ABO血型系统是人类最重要的血型分类系统之一，其准确鉴定是输血安全和器官移植成功的关键。ABO反定型检测作为血型鉴定的核心环节，通过检测血清中抗A、抗B抗体的存在，与正定型结果相互验证，可有效避免因弱抗原或亚型导致的误判风险。近年来，柱凝集法因其灵敏度高、结果判读客观等特点，逐渐成为ABO反定型检测的主流技术。该方法利用特制微柱凝胶介质，通过离心作用分离凝集反应与非凝集细胞，显著提升了检测的标准化程度，尤其在处理疑难血型标本时展现出独特优势。
ABO反定型检测卡（柱凝集法）主要针对以下核心项目：1）血清中抗A抗体效价检测；2）抗B抗体效价检测；3）自身抗体筛查；4）不规则抗体初步鉴别。临床应用中需特别注意新生儿、老年人、免疫缺陷患者等特殊人群的检测，这些情况下可能出现抗体缺失或减弱现象。针对造血干细胞移植后的血型转换监测，该检测方法能够准确追踪供受体抗体消长动态。
规范化的操作流程包括：1）样本预处理：采用3000rpm离心10分钟分离血清；2）检测卡准备：将A1、B型试剂红细胞悬液按比例加入微柱反应室；3）加样：准确加入50μl待检血清；4）离心孵育：按仪器设定程序进行孵育（通常37℃ 15分钟）和离心（1000rpm 10分钟）；5）结果判读：通过专用光学判读系统分析细胞沉降模式，0级（完全凝集）至4+级（无凝集）分级报告。关键质量控制点包括试剂效期验证、离心参数校准和每日质控品检测。
现行检测标准体系主要包括：1）国际标准：AABB技术手册第32版（2024）、CLSI H02-A6文件；2）国家标准：WS/T 794-2022《输血医学基本术语》、WS/T 623-2018《全血及成分血质量监测指南》；3）行业规范：要求抗A/B试剂红细胞抗原表达强度≥3+，抗体效价检测下限≤1:64。实验室需建立完整的质量管理体系，涵盖人员资质（需持有临床输血资格证书）、设备校准（每月光学判读仪线性验证）和室间质评（参加CNAS认可的能力验证项目）。
新一代检测卡已集成多重检测功能：1）同步检测ABO/RhD血型；2）集成抗人球蛋白检测模块；3）嵌入式信息化芯片实现自动结果录入。前沿研究聚焦于纳米标记技术增强凝集可视化、人工智能辅助弱凝集判读等方向。临床实践中应注意：当正反定型不符时，需结合吸收放散试验、分子生物学分型等技术进行综合判断。
